Contaminación del suero fetal bovino con virus de la diarrea viral bovina / Contamination of bovine fetal serum with bovine viral diarrhea virus

Fetal bovine serum (FBS) used in cell culture may be contaminated with viruses, among them bovine viral diarrhea virus (BVDV) affecting the production of biological reagents and the results of diagnosis. The filtration process used in the preparation of commercial FBS abrogates most viral agents that may be present in raw FBS, but BVDV may pass through the filters because of its small size and its pleomorphism. While detection of bovine herpes virus-1 and parainfluenza-3 (PI-3) is determined by observation of the cytopathic effect, and also by hemadsorption in the case of PI-3, the most frequently isolated BVDV is non cytopathic, and infects cells without morphological alterations, inducing problems that arise after several cell generations. Batches of raw and processed FBS were analyzed. Frequencies of BVDV detection in raw serum in Argentina were similar to those published for USA. By conventional methods for BVDV detection, only 2 of 20 commercial batches of FBS had BVDV. Using cell cultures maintained with high concentrations of the serum under study for at least 2 weeks, with detection of viral antigen by indirect immunofluorescence, the percentage of BVDV detection was 80. This method shows that most lots of commercial FBS contain BVDV. RT-PCR allows faster detection of the viral genome, but it must be validated, as it does not show viral replication. To eliminate the problem of BVDV contamination in FBS, only gamma irradiated FBS is used in our laboratory.

Comparison of three serological techniques for the diagnosis of bovine herpesvirus type 1: serum neutralization, enzyme-linked immunosorbent assay and indirect immunofluorescence

La seroneutralización (SN) en cultivos celulares, hemoaglutinación pasiva (HA), la inmunofluorescencia indirecta (IFI) y las pruebas inmunoenzimáticas (ELISA) son de utilizadas para la detección de anticuerpos específicos contra Herpesvirus-bovino 1 (BHV-1). La prueba de SN es la determinación de referencia, sin embargo las dificuldades de implementación por la necessidad de contar con cultivos celulares, así como la celeridad en la obtención de resultados, determinan la optimización de otra prueba de alternativa y equivalente especificidad y sensibilidad. Trabajos previous describen una alta correlación entre las técnicas de SN vs IFI y de SN vs ELISA, destacando una mayor sensibilidad para el ELISA. El presente trabajo compara la sensibilidad y especificidad de IFI, ELISA y SN en la detección de anticuerpos a BHV-1 utilizando 105 sueros bovinos. La especificidad de las técnicas comparadas se demostró por la seroconversión obtenida en sueros de animales experimentalmente infectados (Cuadro 1). Se observó una alta asociación entre sueros reactivos y no reactivos entre SN e IFI, SN y ELISA y entre Ifi y ELISA destacándose una mayor sensibilidad para el ELISA (Figuras 2 y 3). El estudio estadístico de los resultados obtenidos con las tres técnicas diagnósticas determinó un alto coeficiente de correlación entre las mismas (Cuadro 2). Debido a la simplicidad y facilidad de ejecución se recomienda la técnica de ELISA para estudios epizootiológicos de larga escala

Enzymelinked immunosorbent, immunofluorescence test and electrophoretic analysis of rotaviral RNA in the diagnosis and characterization of the bovine rotavirus

Two handred and ninety five faecal samples from 45 days old calves with and without diarrhoea were processed using the ELISA, PAGE, and IFT techniques for rotavirus detection. Ninety one sample (31%) proved to be positive bu at least one of the techniques used. ELISA detected 93%, PAGE 84% and IFT 67%. Fifteen per cent of the samples were positive using ELISA and negative using PAGE, The reverse situation appeared in 5% of the samples. In 5%, 4% and 1% only of the techniques used showed the presence of the virus (ELISA, PAGE and IFT, respectively). ELISA proved to be the most sensitive technique for the detection of rotavirus in the faeces of calves. No relationship could be established between detection of rotavirus by any one of teh techniques used and age, imptomatology, geographical distribution, and electrophoretic pattern. Rotavirus was detected more frequently in diarrheic than in non-diarrheic calves

Respuesta en cobayos a la vacunación con virus Parainfluenza-3 / Response of guinea pigs to vaccination with Parainfluenza-3 virus

Se elaboró una vacuna inactivada con la cepa LQ-514 del virus Parainfluenza-3 aislado en brotes de neumonía en terneros de 30 a 60 días de edad y cepas de Pasteurella hemolítica y P. multocida. En este trabajo se estudió la posibilidad de evaluar dicha vacuna con adyuvante oleoso en cobayos de 1 a 2 meses de edad, a través de la respuesta de anticuerpos y aislamiento de virus luego de la descarga. En los animales vacunados pudieron detectarse anticuerpos inhibidores de la hemoaglutinación a partir del día 14 p.i. llegando a títulos máximos el día 28 p.i. A los tres días de la descarga se evidenció una respuesta de tipo secundario en los animales vacunados, alcanzando el máximo al cuarto día. El virus pudo aislarse en cultivos celulares a partir de pulmón de animales no inmunizados los días 3,4 y 5 post descarga, evidenciándose además su presencia por inmunofluorescencia directa y por microscopía electrónica. Por el contrario, en los animales vacunados y descargados no pudo aislarse virus de pulmón ni ponerse en evidencia por inmunofluorescencia directa o microscopía electrónica

Rinotraqueitis infecciosa bovina (VHB-1). II: Propiedades fisico-quimicas de la cepa L-114. / Infectious bovine rhinotracheitis (VHB-1). II.Physico-chemical properties of the L-114 strain

Se determino la estabilidad termica, densidad de flotacion y morfologia de la cepa L-114 de virus de la rinotraqueitis infecciosa bovina, aislada recientemente en el pais. La morfologia correspondio a un virus con envoltura, de 200 mm de diametro total y 90 mm de diametro del "core". La estructura de este ultimo fue de tipo icosaedrica, observandose particulas vacias y completas en la preparaciones purificadas de virus. A 37o C, cepa L-114 perdio mas del 90% de su infectividad en 15 hs. y a 56o C se inactivo muy rapidamente, perdiendo 3 log en 24 minutos. La densidad de flotacion en cloruro de cesio, luego de su concentracion por sedimentacion a traves de sacarosa al 47% (p/v), indica que el virus purificado tiene una densidad estimada de 1,25 g/ml, correspondiente a los virus herpes denominados livianos